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        上海精宏

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        正常小鼠免疫功能的分析(精宏DKB-501使用)

        返回列表 來源:未知 發(fā)布日期:2019-12-26 10:51【

        多糖是由多個(gè)單糖分子以糖苷鍵結(jié)合而成的天然大 分子化合物,廣泛存在于動、植物及微生物體內(nèi),在抗肝 炎、抗病毒、抗腫瘤、抗心血管疾病、抗衰老、提高免疫力、 降糖等方面具有特殊的生物活性。靈芝、螺旋藻和鎖陽 的主要活性成分之一均是多糖。如靈芝多糖能夠增強(qiáng)腫瘤 小鼠巨噬細(xì)胞的吞噬功能,促進(jìn)淋巴細(xì)胞增生,增強(qiáng) T 殺 傷細(xì)胞的細(xì)胞毒作用,促進(jìn)細(xì)胞因子如白細(xì)胞介素等;螺 旋藻多糖能增強(qiáng)小鼠骨髓細(xì)胞增殖能力,促進(jìn)胸腺、脾臟等 免疫器官的生長和促進(jìn)血清蛋白的生物合成;鎖陽多糖能 提高衰老小鼠巨噬細(xì)胞吞噬能力和脾臟淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力。


        1 材料與儀器 


        1.1 實(shí)驗(yàn)動物 


        健康昆明種雄性小鼠,8~10 周齡,體質(zhì)量(20±2) g, 由蘭州大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動物中心提供。動物合格證號為: 甘醫(yī)動字第 14-006。 1.2 儀器 DKB-501 數(shù)顯超級恒溫水浴鍋 (上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司);微量進(jìn)樣器(上海安亭微量進(jìn)樣器廠);游標(biāo)卡 尺(安徽量具刀具廠);AL204 電子天平[梅特勒—托利多 儀器(上海)有限公司];722 型可見光光度計(jì)(上海光譜儀 器有限公司);DD5M 立式大容量離心機(jī)(湖南凱達(dá)科學(xué)儀 器有限公司);SKJH-2112 超凈工作臺(上海蘇坤實(shí)業(yè)有限 公司);旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀;冷凍干燥機(jī)。 


        1.3 材料與藥品 


        螺旋藻干粉、靈芝干粉、鎖陽干粉,均由甘肅省微藻工 程技術(shù)研究中心提供;綿羊紅細(xì)胞(SRBC)、豚鼠血清、小 牛血清均購自北京元亨金馬生物科技開發(fā)有限 公 司); 95%乙醇、氯仿、正丁醇、葡糖糖、5%苯酚、濃硫酸、氯化 鈉、氯化鉀、硫酸鎂、氯化鎂、氯化鈣、磷酸氫二鈉、磷酸二 氫鉀、碳酸氫鈉、檸檬酸鈉均為分析純。 1.4 方法與步驟 1.4.1 螺旋藻、靈芝、鎖陽 3 味單味藥的粗多糖提取 稱取 螺旋藻、靈芝、鎖陽干粉各 100 g,分別按料液比 1∶10 分別加 入蒸餾水浸泡 2 d,各加入 1 g 纖維素酶和 1 g 果膠酶,50 ℃ 水浴提取,過濾,離心 10 min,取上清液。循環(huán)提取 2 次,合并 上清液,減壓濃縮,Sevage 法除蛋白,乙醇沉淀,真空冷凍干 燥,分別獲得螺旋藻、靈芝、鎖陽單味藥的粗多糖干粉。 1.4.2 螺旋藻、靈芝和鎖陽的復(fù)合粗多糖制備 采用硫 酸-苯酚法分別測定螺旋藻、靈芝、鎖陽 3 味單味藥的粗多 糖含量。螺旋藻粗多糖含糖量為 30.8%,靈芝粗多糖含糖 量為 44.9%,鎖陽粗多糖含糖量為 40.9%。將分別制備的 螺旋藻粗多糖干粉、靈芝粗多糖干粉和鎖陽粗多糖干粉,按 照多糖含量為 1∶1∶1 的比例制成復(fù)合多糖,4 ℃冷藏備用。 1.4.3 動物分組及給藥 將小鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為 5 組,每 組 10 只,分別為正常對照組,螺旋藻多糖組(100 mg/kg·bw), 復(fù)合粗多糖低劑量組(50 mg/kg·bw)、中劑量組(100 mg/kg·bw)、 高劑量組(200 mg/kg·bw),連續(xù)灌胃 21 d,正常對照組灌 胃生理鹽水。


        2 效果


        與正常對照組相 比,螺旋藻多糖組與復(fù)合粗多糖組均可顯著提高正常小鼠 的脾指數(shù)與胸腺指數(shù)(P<0.05),且隨著復(fù)合粗多糖劑量的 增加,脾指數(shù)與胸腺指數(shù)呈劑量效應(yīng);復(fù)合粗多糖組與螺 旋藻多糖組比較,中劑量復(fù)合粗多糖組、高劑量復(fù)合粗多 糖組的脾指數(shù)與胸腺指數(shù)顯著高于螺旋藻多糖組(P<0.05), 低劑量復(fù)合多糖組脾指數(shù)與胸腺指數(shù)均略高于螺旋藻多 糖組,差異不顯著(P>0.05)。表明粗多糖能提高小鼠的脾指數(shù)與胸腺指數(shù),中劑量復(fù)合粗多糖、高劑量復(fù)合粗多糖 比單味藥螺旋藻多糖效果更顯著。


        3 分析 


        3.1 不同來源的多糖具有各自的生物活性


        現(xiàn)代研究證 明,一些多糖共同作用時(shí),效果比單一多糖更佳,藥效呈現(xiàn) 協(xié)同性。目前,對復(fù)合多糖的研究主要集中在抗腫瘤及免 疫調(diào)節(jié)作用方面。 


        3.2 分別灌胃單味藥螺旋藻多糖以及螺旋藻、靈芝和鎖陽 的復(fù)合多糖


        均可可增加小鼠免疫器官指數(shù),提高腹腔巨 噬細(xì)胞的吞噬功能,增強(qiáng)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)以及提高血 清半數(shù)溶血值。其機(jī)制可能因?yàn)槎嗵亲鳛榉翘禺惪乖碳ば∈罅馨图?xì)胞的增殖而提高機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫功 能;通過促進(jìn)腹腔巨噬細(xì)胞的增值和激活巨噬細(xì)胞的吞噬 功能,提高正常小鼠非特異性免疫功能。各指標(biāo)均反映中 劑量、高劑量復(fù)合多糖組作用顯著高于單味藥螺旋藻多糖 組,與黃芪、酵母胞壁和蟲草菌絲體復(fù)合多糖以及香菇、靈 芝、灰樹花復(fù)合多糖的研究結(jié)果一致,可見復(fù)合多糖能 協(xié)同、高效地調(diào)節(jié)正常小鼠免疫機(jī)能。




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