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        澤蘭多糖超聲提取工藝的優(yōu)化

        返回列表 來源:未知 發(fā)布日期:2019-11-29 09:27【

        澤蘭源于唇形科地筍屬植物毛葉地瓜兒苗 Lycopus lucidus Turcz. var. hirtus Regel 的干燥地上部分,夏 秋二季莖葉茂盛時采割,除去雜質(zhì),曬干。具有活血調(diào) 經(jīng),袪瘀消癰,利水消腫之功。用于月經(jīng)不調(diào),經(jīng)閉,痛 經(jīng),產(chǎn)后瘀血腹痛,瘡癰腫痛,水腫腹水,澤蘭資源豐 富,價格便宜,分布于全國大部地區(qū)。對于澤蘭多糖 的超聲提取工藝在國內(nèi)外尚未見公開報道,故本研究 以澤蘭多糖的超聲提取工藝作為研究對象。

        1 實驗材料

        1. 1 儀器

        MAPADA UV - 1800 紫 外 - 可 見 分 光 光 度 計; METTLER AE240 十萬分之一精密天平( 瑞士) ; Sartorious BS224S 萬分之一精密天平 ( 北京賽多利斯公 司) ; KQ - 700DB 型數(shù)控超聲波清洗器( 昆山市超聲儀 器有限公司) ; EYELA N - 100 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀( 上海愛朗 儀器有限公司) ; SHZ - D( Ⅲ) 型循環(huán)水式多用真空泵 ( 鞏義市予華儀器有限責任公司) ; 精宏DHG-9146A 型電 熱恒溫鼓風干燥箱( 上海精宏實驗設備有限公司) ; XJA 100A 型高速粉碎機( 姜堰市銀河儀器廠) ; 京立LD25 - 2 離心機( 北京京立離心機有限公司) 。

        1. 2 材料

        澤蘭藥材購自鄭州市東升大藥房,經(jīng)河南中醫(yī)藥 大學藥學院生藥學科董成明教授鑒定為唇形科地筍屬 植物毛葉地瓜兒苗 Lycopus lucidus Turcz var. hirtus Regel 的干燥地上部分。 無水乙醇( 天津市福晨化學試劑廠) 、苯酚( 天津 市恒星化學試劑有限公司) 、硫酸( 開封市藥品化學試 劑廠) ,均為分析純。

        2 實驗方法與結(jié)果

        2. 1 計算方法

        藥材中以葡萄糖計多糖的提取率 W = m /M × 100% ( m 為以葡萄糖計藥材中多糖的質(zhì)量,M 為藥材 質(zhì)量) 。

        2. 2 澤蘭多糖含量測定的方法

        2. 2. 1 葡萄糖標準品溶液的配制

        精密稱取 105 ℃ 干燥至恒重的無水葡萄糖標準品 111. 16 mg,置 100 mL 容量瓶中,加水溶解并稀釋至刻度,搖勻,即得濃度 為 1111. 6 μg /mL 的葡萄糖貯備液,備用。

        2. 2. 2 標準曲線的建立

        精密吸取葡萄糖貯備液 0. 5,1. 0,2. 0,4. 0,6. 0,8. 0 mL 于 100mL 容量瓶中,蒸 餾水定容,搖勻,得葡萄糖濃度分別為 5. 558、11. 116、 22. 232、44. 464、66. 969、88. 928 μg /mL 的標準溶液。 分別量取上述葡萄糖標準液與蒸餾水空白溶液 2. 0 mL 于 15 mL 試管中,分別加 1 mL 苯酚溶液、5 mL 濃 硫酸溶液振蕩搖勻,室溫反應 30 min ,蒸餾水作為空 白,以吸光度為縱坐標,濃度為橫坐標,繪制標準曲線, 得標準曲線方程為: Y = 76. 591X - 0. 0846,r = 0. 9997, 結(jié)果表明,葡萄糖濃度在 5. 558 ~ 88. 928 μg /mL 范圍 內(nèi),與吸光度線性關系良好。

        2. 3 藥材粉碎的必要性考察

        精密稱定未粉碎的藥材 5 份,每份 2 g。料液比 1: 30( g: mL) ,置具塞的 150 mL 的錐形瓶中,在超聲清 洗器中 25 ℃、700 W 超聲 15 min,2 次,提取液用 200 目濾網(wǎng)濾過合并兩次濾液。離心( 3000 r/min) 5 min, 棄去沉淀,上清液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至 20 mL。濃縮 液置燒杯中,把燒杯放在磁力攪拌器上,勻速快速攪 拌,緩慢加入 80 mL 無水乙醇,使溶液成 80% 的乙醇, 然后放在 4 ℃的冰箱里,靜置 1 h。離心( 3000 r/min) 5 min,用無水乙醇洗滌沉淀離心至上清液無色,沉淀 放在真空干燥箱 40 ℃,干燥至干,即得澤蘭粗多糖,稱 取澤蘭粗多糖 3 mg 左右,用蒸餾水定容在 25 mL 量瓶中,按“2. 2. 2”項下方法測其粗多糖中以葡萄糖計多 糖的含量,計算出藥材中以葡萄糖計多糖的質(zhì)量。

        3 討論

        本實驗在優(yōu)選超聲提取澤蘭多糖工藝參數(shù)時,首 先采用的響應面的 Box - Behnken 法設計,用軟件 Design - Expert. 8. 05 進行二次多項式擬合。結(jié)果顯示, 軟件自動擬合的二次多項式方程,有多項因子對模型 的影響 P 值大于 0. 05,且失擬項的 P 值小于 0. 05,故 需要人工去因子重新擬合??山Y(jié)果,進行了多個 人工擬合方案都不能達到所有因子達到對模型顯著影 響,且失擬項的 P 值一直處在小于 0. 05 的水平上,這 說明本實驗超聲提取澤蘭多糖的工藝選擇的參數(shù)值及 多糖提取率,不適合響應面法分析,對二次多項式所建 立的模型的契合度不夠。因此,本實驗采用了適應性 較強的正交實驗設計來優(yōu)化超聲提取澤蘭多糖的工 藝。



         


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