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        上海精宏

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        總黃酮含量測定及不確定度評定

        返回列表 來源:未知 發(fā)布日期:2019-10-25 09:54【

        試驗(yàn)樣品在制備、測量過程中,通常會因操作或者 測量用具等原因而不可避免的產(chǎn)生誤差,因此多數(shù)測 量值只能反映出真實(shí)值的近似值。不確定度是合理的 表征賦予被 測 量 值 的 分 散 性 與 測 量 結(jié) 果 相 關(guān) 聯(lián) 的 參 數(shù),是 一種科學(xué)、合理的質(zhì)量控制 方法和驗(yàn)證手段,能夠較為準(zhǔn)確的評估測量結(jié)果。

        儀器與試藥

        1 儀 器

        AE240分析天平(梅特勒-托利多公司),DK-S26電 熱 恒 溫 水 浴 鍋(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司),UV-2550紫外分光光度計(日本島津公司), 玻璃器皿為天玻牌 A 級。

        2 試 劑 與 試 藥

        柴 胡 利 膽 顆 粒 (自 制,批 號 180320,180326,180409),黃芩苷對照品(中國藥品生物 制品 檢 定 所,批 號110715-200514,含 量 測 定 用),乙 醇 (上海沃凱生物技術(shù)有限公司,分析純),無水乙醇(廣東 翁江化學(xué)試劑有限公司,分析純),純化水(自制)。

        方法與結(jié)果

        1 溶液的制備

        1.1 對照品溶液的制備

        精密稱取黃芩苷對照品 10.47mg,以無水乙醇定容于50ml容量瓶中,再精密 量?。担恚熘粒保埃恚烊萘科恐?,加無水乙醇至刻度線, 搖勻,即得。

        1.2 供試品溶液的制備

        取 本 品18.7315g,精 密 加入70%乙醇50ml,熱回流提?。炒?,每次1h,收集 提取液,過濾,合并,蒸干,用無水乙醇溶解,定容于50 ml容量瓶中,加無水乙醇定容至刻 度 線,搖 勻 后 精 密 移?。怠担埃恚烊萘科恐?,加無水乙醇至刻度線,搖勻, 即得。

        1.3 陰 性 樣 品 溶 液 的 制 備

        取 用 黃 芩 陰 性 樣 品 18.8734g,照“1.2 供試品溶液的制備”法,制備陰性樣 品溶液,備用。

        2 檢測波長選擇

        分別取對照品溶液、供試品溶 液和陰性樣品溶液,在200~400nm 范圍進(jìn)行紫外全 波長掃描,結(jié)果顯示,黃芩苷對照品溶液與供試品溶液 光譜圖基本一致,且陰性無干擾,最終選擇檢測波長為 278nm。

        3 線性及線性范圍的考察

        精密吸取對照品溶 液1.0、2.0、4.0、6.0、8.0ml,分別置于10ml容量瓶中, 加無水乙醇稀釋到刻度,搖勻,分別取上述溶液,采用 UV-Vis進(jìn)行測定,以吸光度 A(Y)為 縱 坐 標(biāo),黃 芩 苷 濃度(mg/ml)(X)為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

        4 方法學(xué)驗(yàn)證

        4.1 精密度和重復(fù)性試驗(yàn)

        精 密 吸 取“1.2”項(xiàng) 下 供試品,在278nm 波 長 下,連 續(xù) 測 定5次,其 吸 光 度 的 RSD%=0.64%,表明精密度良好。

        4.2 穩(wěn)定性試驗(yàn)

        精密吸取“1.2”項(xiàng)下供試品,在 278nm 波長下,分別于0、1、3、6、9、12h測定,測定6 次,其吸光度的 RSD%=0.77%,表 明 溶 液 在12h內(nèi) 的穩(wěn)定性良好。

        4.3 重現(xiàn)性試驗(yàn)

        取同一批次的柴胡利膽顆粒5 份,分別按“1.2”項(xiàng)下平行制備 供 試 品 溶 液,依 法 進(jìn) 行 測定,結(jié)果 RSD%=1.26%,表明樣品重現(xiàn)性良好。

        4.4 回收率試驗(yàn)

        精密稱取已知含量的供試品5份,分別精密加入黃芩苷對照品,照“1.2”項(xiàng) 下 制 備 供 試品溶液,依法測定其中總黃酮含量。

        討 論

        不確定度的評定,與方法學(xué)驗(yàn)證一樣,將成為分 析領(lǐng)域的重點(diǎn)和難點(diǎn),2020年版藥典擬增加《藥品檢 測結(jié)果的不確定度評定指導(dǎo)原則》的 征 求 意 見 稿, 可見不確定度評定越來越受重視。

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