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        蒲公英中綠原酸酶法提取工藝研究

        返回列表 來源:未知 發(fā)布日期:2019-10-21 11:07【

        蒲公英 (拉丁學(xué)名 Taraxacum mongolicum Hand.- Mazz.) 菊科,蒲公英屬多年生草本植物。根呈圓錐 狀,表面棕褐色,皺縮,葉邊緣有波狀齒或羽狀深裂, 基部漸狹成葉柄,葉柄及主脈常帶紅紫色,花葶上部 為紫紅色,密被蛛絲狀白色長柔毛;頭狀花序,總苞 鐘狀,瘦果暗褐色,長冠毛白色,花果期為 4 月— 10 月。根據(jù)我國植物志記載,蒲公英屬有 2 000 多 種,在中國分布有 70 多種,廣泛分布于東北、華 北、華中、西北和西南的各省區(qū)。

        1 材料與方法

        1.1 主要材料

        蒲公英、圣女果、纖維素酶、綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品、 95%乙醇、氫氧化鈉、抗壞血酸、酚酞,實驗室提供。

        1.2 主要儀器

        數(shù)顯恒溫水浴鍋,金壇市醫(yī)療儀器廠產(chǎn)品;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器,上海亞榮生化儀器廠產(chǎn)品;分析天平, 上海越平科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品;電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱,上海精宏實驗設(shè)備有限公司產(chǎn)品;臺式高速 離心機,長沙湘智離心機儀器公司產(chǎn)品。

        1.3 試驗方法

        1.3.1 蒲公英綠原酸提取工藝流程

        制樣→加纖維素酶混合→水浴→滅酶→過濾→ 減壓濃縮→定容→分光光度法。

        1.3.2 操作要點

        (1) 制樣。在低溫的條件下,烘干粉碎蒲公英。 然后將粉碎后的蒲公英過 80 目篩。
        (2) 混合。稱取 2 g 蒲公英干粉,加入一定量的纖維素酶和體積分?jǐn)?shù) 60%乙醇混合均勻。
        (3) 水浴。用保鮮膜封口,并且恒溫水浴一定 時間。
        (4) 滅酶。當(dāng)水浴反應(yīng)一段時間后,立即將錐形 瓶用沸水浴滅酶 5 min,并且將錐形瓶冷卻至室溫。
        (5) 過濾。用減壓過濾裝置,過濾樣品,并且 用少量的體積分?jǐn)?shù) 60%乙醇潤洗抽濾瓶。
        (6) 減壓濃縮。將過濾好的樣品,放進旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)儀中。調(diào)整旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀轉(zhuǎn)速和溫度 (50 ℃),時間 (20 min) 得到濃縮液,記錄濃縮液體積。
        (7) 定容。用體積分?jǐn)?shù) 60%乙醇,將 0.1 mL 的 濃縮液緩慢定容至 10 mL。
        (8) 測定。于波長 327 nm 處測定其吸光度,并 且做 3 次平行,計算綠原酸含量。

        1.3.3 蒲公英綠原酸提取工藝研究

        以纖維素酶添加量、料液比、酶解溫度、酶解 時間為影響因素。以綠原酸提取率為評價指標(biāo),研 究 4 個變量對蒲公英綠原酸提取率的影響,確定最 佳提取工藝。

        1.3.4 綠原酸對圣女果保鮮作用研究

        以圣女果為研究材料,將圣女果分為 9 份,每 份大概 500 g,分別用質(zhì)量濃度 25,50 mg/L 的綠原 酸溶液噴灑在圣女果上,以蒸餾水處理作為對照, 自然晾干,重復(fù) 3 組平行。在第 1,3,5,7,9, 11,13,15 天分別測定圣女果的失質(zhì)量率、維 C 含 量、可滴定酸含量、可溶性固形物含量、好果率,對 不同質(zhì)量濃度綠原酸對圣女果的保鮮效果進行研究。

        2 結(jié)果與分析

        蒲公英綠原酸的提取率,隨纖維 素酶添加量的增加,綠原酸提取率呈現(xiàn)先上升后下 降的趨勢。纖維素酶添加量為 0.8%~1.0%時,綠原 酸的提取率逐漸升高達到最高值。這可能是由于纖 維素酶添加量增高,能夠充分分解蒲公英細胞壁中 的纖維素,綠原酸更好地溶出。所以,選取纖維素 酶添加量 1%為提取的最佳添加量。選取纖維素酶添 加量為 0.8%,1.0%,1.6%這 3 個水平進行正交試驗 結(jié)果分析。蒲公英綠原酸的提取率,隨酶解 溫度的升高呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢。當(dāng)酶解溫度 低于 50 ℃時,隨著酶解溫度的升高,纖維素酶的活性 逐漸變高,其綠原酸的提取率逐漸增加;在 50 ℃的時 候,酶的活性最強,綠原酸的提取率達到了最大值; 當(dāng)酶解溫度超過 50 ℃時,蒲公英綠原酸的提取率, 穩(wěn)定性下降??赡苁且驗槊傅幕钚允芊磻?yīng)溫度的影 響,溫度過高使酶失活。同時,酶解溫度過高,綠 原酸受熱被破壞。因此,選取酶解溫度 30,40,50 ℃ 這3 個水平進行正交試驗結(jié)果分析。在其他條件不變的情況下,當(dāng)料液 比逐漸增加,綠原酸的提取率先增加后逐漸減少。 低于 1∶16 時,隨著料液比的增加,綠原酸的提取 率逐漸增加,這可能是因為乙醇將綠原酸更好地溶 出;當(dāng)料液比超過 1∶16 時,綠原酸提取率穩(wěn)定下 降??赡苁且驗榱弦罕冗^高,綠原酸質(zhì)量濃度下降。 因此,選取料液比為 1∶14,1∶16,1∶18 (g∶ mL) 這 3 個水平進行正交試驗結(jié)果分析。

        3 結(jié)論

        通過原料配比正交試驗和穩(wěn)定劑正交試驗得出, 當(dāng)沙棘漿添加量 25%,枸杞漿添加量 15%,蜂蜜添 加量 2%,白砂糖添加量 6%,黃原膠添加量 0.06%, CMC- Na 添加量 0.04%,果膠添加量 0.07%時,所制 得的產(chǎn)品色澤呈橙黃色;氣味清香宜人,具有沙棘 和枸杞獨特的香氣,無異味;口感細膩、酸甜適口; 組織狀態(tài)均勻,穩(wěn)定性較好,無分層、沉淀現(xiàn)象。

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