牙科種植修復已經(jīng)成為牙列缺損或牙列缺失的一種 常規(guī)治療手段，純鈦及其合金作為種植體材料具有良好的 生物相容性。隨著口腔種植研究的不斷發(fā)展，簡化治療流程，縮短治療時間，提高種植手術(shù)的遠期成功率是目前最 為關(guān)注的問題。其根本解決辦法是對種植體表面進行生化 改性，以期加快形成種植體骨結(jié)合，早期功能負載，有效降低術(shù)后種植體周圍炎的發(fā)生率。

純鈦片（99.99%，陜西寶雞鵬 潤新金屬材料有限公司）、蒲公英多糖（95%，陜西慈緣生物技術(shù)有限公司）、牙齦卟啉單胞菌（廣東省微生物研究所）、臺盼藍（北京雷根生物技術(shù)有限公司）、BHI血 瓊脂平板（廣東環(huán)凱微生物科技有限公司）、直流恒壓 電源（DPM8600，杭州鈞策器械股份有限公司）、厭氧工 作站（上海萬銳實驗室設(shè)備有限公司）、場發(fā)射掃描電鏡 （Merlin，德國）、X射線光電子能譜儀（THERMO FISHER SCIENTIFIC，美國）、倒置熒光顯微鏡（OLYMPUS，日本）

商業(yè)圓形純鈦片（10mm× 10mm×1mm）依次經(jīng)800# 、1000# 、1200# 鷹派砂紙打磨，丙 酮、乙醇、去離子水超聲清洗，每次15min，空氣中干燥備 用。在玻璃燒杯中配制300ml電解液（乙二醇97vol%、氟化 銨0.5wt%、水3vol%）。連接直流恒壓電源，將鈦片置于陽 極，鉑片置于陰極，設(shè)置氧化電壓20V，氧化時間2h。氧化 完成后鈦片置于450℃高溫馬弗爐中燒結(jié)3h，乙醇、去離子 水超聲清洗，每次5min，鈦片清洗完成后置于烘烤箱中干 燥備用。

稱取一定量的蒲公英多糖粉末溶于無水乙醇/DMSO (DMSO＜1vol%)，分別配 制濃度為50mg/ml、100mg/ml、200mg/ml的蒲公英多糖溶 液。將陽極氧化處理的鈦片分別置于三種不同濃度的多糖 溶液，超聲振蕩處理30min。去離子水漂洗鈦片，去除表面 未負載的多糖，空氣中干燥備用。設(shè)置陽極氧化鈦片為對 照組（A組），陽極氧化鈦片負載不同濃度的蒲公英多糖為 實驗組：多糖濃度50mg/ml（B組），100mg/ml（C組）， 200mg/ml（D組）。

FESEM結(jié)果：對照A組鈦片表面可見管 徑均勻的納米管陣列，納米管管壁光滑，直徑約80～100nm （圖1a）。實驗組（B、C、D組）鈦片表面可見納米管表面 及管內(nèi)有白色粟粒狀顆粒物沉積（圖1b、圖1c、圖1d）。 圖中可以看出顆粒物的量與負載蒲公英多糖的濃度呈正相 關(guān)，D組＞C組＞B組。

XPS檢測結(jié)果：實驗組（B、C、D 組）和對照組（A組）鈦片表面均含有C、N、O元素，實驗 組特征性C元素峰值顯著增高，且與負載蒲公英多糖的濃度 呈正相關(guān)，D組＞C組＞B組。 2.3 牙齦卟啉單胞菌(Pg)臺盼藍染色：臺盼藍染色結(jié)果： 熒光顯微鏡下觀察活菌呈現(xiàn)透明，死菌被染成藍色。實驗 組（B、C、D組）鈦片表面死菌數(shù)量顯著高于對照組（A 組），各實驗組間鈦片表面死菌數(shù)量與負載蒲公英多糖的 濃度呈正相關(guān)，D組＞C組＞B組。

隨著現(xiàn)代納米技術(shù)的發(fā)展，材料表面納米化改性已成為增加鈦 種植體表面粗糙度的一種優(yōu)良方法。有學陣列者研究表明， 采用乙二醇-氟化銨水溶液為電解液，陽極氧化電壓為20V， 氧化時間為2h的條件下，可制備出高度有序的TNTs。本 實驗采用相同的氧化參數(shù)成功在鈦片表面制備出二氧化鈦 納米管，場發(fā)射掃描電鏡下觀察納米管結(jié)構(gòu)規(guī)整，直徑約 80～100nm，管壁光滑，實驗結(jié)果與以往研究相一致。二氧化鈦納米管負載蒲公英多糖復合涂層的抗菌性： 上海精宏認為目前公認菌斑聚集是導致種植體周圍炎的始動因子，聚集 在種植體周圍的菌斑主要為革蘭氏陰性厭氧菌，尤其是牙 齦卟啉單胞菌。為了研究蒲公英多糖改性的納米管的抗 菌性，本研究選定了牙齦卟啉單胞菌為研究對象。實驗采 用臺盼藍染色法檢測牙齦卟啉單胞菌活性，正?；罹?結(jié)構(gòu)完整，排斥臺盼藍染液進入菌體，當細菌活性喪失， 胞膜通透性增加，因而被染成藍色。本實驗結(jié)果顯示，染 色后顯微鏡下觀察到實驗組鈦片表面死菌數(shù)量顯著高于對 照組（P＜0.05），實驗組中負載高濃度多糖的納米管表面 死菌數(shù)量高于負載中濃度多糖的納米管（P＞0.05）和負載 低濃度多糖的納米管（P＜0.05），可以得出二氧化鈦納米管負載蒲公英多糖復合涂層對牙齦卟啉單胞菌具有較強的 抗菌性，在一定范圍內(nèi)，抗菌活性與蒲公英多糖濃度成正 相關(guān)關(guān)系。關(guān)于蒲公英多糖的抗菌機制，有研究表明，蒲 公英多糖可抑制細菌細胞壁的合成，促使細胞壁破裂，還 能抑制DNA和蛋白質(zhì)的合成。有關(guān)蒲公英多糖抑制牙齦 卟啉單胞菌活性的具體作用機制尚不清楚，有待后續(xù)實驗 進一步研究。